Plasmide Double Nickase (h) Ameloblastin: sc-403086-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ameloblastin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ameloblastin Double Nickase (h) et le plasmide Ameloblastin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AMBN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ameloblastin Antibody (H-2): sc-271012
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ameloblastin | sc-403086-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ameloblastin | sc-403086-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMBN code l’améloblastine, une protéine sécrétée de la matrice de l’émail exprimée par les améloblastes, qui contribue à la formation de l’émail en régulant l’organisation de la matrice extracellulaire, le dépôt minéral et l’adhésion à l’interface améloblaste–matrice. L’améloblastine participe à des programmes du développement qui coordonnent la polarité des cellules épithéliales, leur différenciation et le remodelage de la matrice au cours de la morphogenèse dentaire, et ses produits de maturation peuvent influencer la signalisation cellule–matrice. L’altération de la fonction d’AMBN est associée à des défauts de l’émail et à des modifications du comportement des améloblastes, et la dérégulation d’AMBN est utilisée comme marqueur dans des études sur la différenciation odontogénique et des pathologies associées. Ces caractéristiques font d’AMBN un locus utile pour étudier la biologie de la matrice extracellulaire, les processus de minéralisation et les interactions épithélio-mésenchymateuses en recherche craniofaciale.
Ameloblastin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AMBN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AMBN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AMBN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AMBN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.