Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
Alox12e CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-419087
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Alox12e CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Alox12e基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Alox12e CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-419087 | 20 µg | $397.00 |
概述
Alox12e 编码花生四烯酸 12-脂氧合酶（12R 型），这是一种非血红素铁依赖的双加氧酶，可催化多不饱和脂肪酸的加氧反应，从而生成具有生物活性的脂质介质。在小鼠表皮中，Alox12e 在脂氧合酶通路中发挥作用，并与相关酶协同参与氧化性脂质加工，支持角质形成细胞分化以及角质层屏障的形成。通过调控脂质氧化产物及其下游信号，Alox12e 有助于维持皮肤屏障稳态、参与炎症反应与应激信号传导。该轴的紊乱与鱼鳞病样屏障缺陷、皮炎相关炎症，以及上皮生物学中更广泛的脂质代谢表型研究密切相关。
Alox12e CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Alox12e基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Alox12e基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Alox12e开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Alox12e蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Alox12e缺失的细胞模型，用于Alox12e信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Alox12e 功能至关重要的 Alox12e 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Alox12e 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Alox12e CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Alox12e CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Alox12e 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Alox12e HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Alox12e HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Alox12e同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Alox12e靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。