Akp-5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419070

개요

Alppl2는 마우스 알칼리성 인산분해효소 동형체인 Akp-5를 암호화하며, Akp-5는 글리코실포스파티딜이노시톨(GPI)로 막에 고정되는 세포외 효소(ectoenzyme)로서 세포 표면에서 세포외 뉴클레오타이드 및 기타 인산 모노에스터를 탈인산화합니다. Akp-5는 국소적인 인산 이용 가능성과 퓨린성 신호전달 중간체를 조절함으로써, 막 연관 대사 과정, 상피 분화 프로그램, 그리고 세포–세포 상호작용에 영향을 미치는 미세환경 신호에 영향을 줄 수 있습니다. Alppl2 발현은 발달 상태 및 계통(라인리지) 정체성과 연관된 맥락에서 보고되어 왔으며, 분화 및 조직 재형성 연구에서 표지자이자 기능적 핵심 지점으로 유용합니다. 알칼리성 인산분해효소 활성의 조절 이상은 세포 성숙의 변화 및 스트레스 반응과 관련해 자주 분석되므로, 비정상적인 성장 조절 및 질환 관련 표현형 모델에서 Alppl2를 연구할 근거를 제공합니다.

Akp-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Alppl2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Alppl2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Alppl2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Akp-5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Akp-5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Alppl2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Akp-5 기능에 중요한 Alppl2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Alppl2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Akp-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Akp-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Alppl2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Akp-5 HDR 플라스미드 (m) 및 Akp-5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Alppl2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Alppl2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.