AKAP 95 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403651-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AKAP 95O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AKAP 95 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AKAP 95 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AKAP8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AKAP 95 Anticorpo (F-11): sc-390335
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AKAP 95 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AKAP 95 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKAP8 codifica a AKAP 95, uma proteína nuclear de ancoragem da A-quinase que atua como plataforma, organizando a PKA e outros fatores regulatórios em compartimentos associados à cromatina para coordenar o controle da expressão gênica dependente de fosforilação. A AKAP 95 participa da organização da cromatina, do processamento e do splicing de RNA, e de eventos mitóticos como a condensação cromossômica e a progressão do ciclo celular, conectando a sinalização à arquitetura nuclear. Por meio dessas funções, AKAP8 é frequentemente estudado em vias que regulam a proliferação, a homeostase de DNA/RNA e programas transcricionais responsivos ao estresse. A desregulação da sinalização nuclear e das redes de splicing associadas à AKAP 95 tem sido implicada em fenótipos relevantes para doenças, incluindo controle de crescimento alterado e processamento aberrante de transcritos na biologia do câncer.
AKAP 95 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AKAP8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AKAP8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AKAP8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AKAP8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.