Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
AKAP 12 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406008-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AKAP 12O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AKAP 12 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AKAP 12 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AKAP12. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AKAP 12 Anticorpo (C-12): sc-376740
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AKAP 12 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AKAP 12 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKAP12 codifica a proteína de ancoragem da A-quinase 12 (AKAP12), uma proteína de andaime que organiza espacialmente PKA, PKC e fosfatases para coordenar a sinalização compartimentalizada na membrana plasmática e no citoesqueleto. Ao integrar sinais de vias acionadas por GPCRs e por fatores de crescimento, a AKAP12 influencia a forma celular, a motilidade, a dinâmica de adesão e a remodelação do citoesqueleto por meio da regulação de processos associados à actina. Alterações na expressão de AKAP12 ou no contexto de sinalização têm sido associadas a programas desregulados de migração e proliferação relevantes para a biologia do câncer e para respostas vasculares/inflamatórias. Essas propriedades tornam a AKAP12 um alvo útil para estudar como a sinalização de quinases ancoradas governa a função de barreira, respostas ao estresse e fenótipos dependentes do microambiente.
AKAP 12 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AKAP12 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AKAP12. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AKAP12. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AKAP12 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.