Ah Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419054-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ah ReceptorO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ah Receptor (m) e o Plasmídeo Double Nickase Ah Receptor (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ahr. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ah Receptor Anticorpo (A-3): sc-133088
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ah Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419054-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ah Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419054-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ahr de camundongo codifica o receptor de hidrocarbonetos arílicos (AhR), um fator de transcrição ativado por ligante que detecta xenobióticos e metabólitos endógenos para regular programas de expressão gênica em tecidos de desintoxicação e de barreira. Após a ativação, o AhR transloca-se para o núcleo, dimeriza com o ARNT e liga-se a elementos de resposta a xenobióticos para induzir alvos como enzimas do citocromo P450, integrando a comunicação cruzada com NF-κB, Wnt/β-catenina e outras vias inflamatórias e metabólicas. A sinalização do AhR modula a homeostase epitelial, a função de células apresentadoras de antígeno e a diferenciação de células T, moldando a imunidade de mucosas e as respostas a estímulos ambientais. A atividade desregulada de Ahr tem sido implicada na sensibilidade a tóxicos, em fenótipos inflamatórios e na biologia tumoral, tornando-o um alvo amplamente utilizado em estudos mecanísticos de interações gene–ambiente.
Ah Receptor O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ahr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ahr. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ahr. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ahr interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.