ADRP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400802-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADRPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ADRP (h) e o Plasmídeo Double Nickase ADRP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PLIN2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ADRP Anticorpo (B-6): sc-377429
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADRP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400802-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADRP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400802-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLIN2 codifica a proteína relacionada à diferenciação adiposa (ADRP), um membro da família das perilipinas associado a gotículas lipídicas, que recobre organelas de armazenamento de lipídios neutros e regula o tráfego de ácidos graxos, a deposição de triglicerídeos e a lipólise. A ADRP participa da biogênese e da renovação das gotículas lipídicas por meio de interações com programas lipogênicos controlados pela sinalização de PPAR e por vias celulares de sensoriamento de nutrientes, moldando o metabolismo oxidativo e as respostas inflamatórias. Alterações na expressão de PLIN2 e o acúmulo de gotículas lipídicas são frequentemente estudados em contextos de esteatose hepática, disfunção metabólica associada à obesidade, formação de células espumosas de macrófagos e estresse lipídico em células cancerosas. Como marcador e regulador do armazenamento lipídico intracelular, a ADRP é amplamente utilizada para investigar a homeostase lipídica, a dinâmica de organelas e a reprogramação metabólica em modelos celulares humanos.
ADRP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PLIN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PLIN2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PLIN2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PLIN2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.