ACCβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401903-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACCβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACCβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACCβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACACB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACCβ Anticorpo (F-9): sc-377313
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACCβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401903-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACCβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401903-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACACB codifica a acetil-CoA carboxilase beta (ACCβ), uma carboxilase dependente de biotina que catalisa a formação de malonil-CoA na membrana externa mitocondrial. Ao controlar os níveis de malonil-CoA, a ACCβ regula a β-oxidação de ácidos graxos por meio da inibição da CPT1, conectando assim a detecção de nutrientes à seleção de combustível mitocondrial e à homeostase energética celular. A atividade da ACACB integra-se à sinalização por AMPK, a programas metabólicos responsivos à insulina e a vias de manejo de lipídios que moldam o metabolismo oxidativo no músculo e em outros tecidos. A desregulação da função da ACCβ e do fluxo de malonil-CoA está associada a fenótipos metabólicos relevantes para obesidade, resistência à insulina e biologia do fígado gorduroso, sustentando estudos mecanísticos sobre estresse celular e inflamação induzidos por lipídios.
ACCβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACACB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACACB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACACB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACACB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.