ABC1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-418929-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ABC1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ABC1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ABC1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Abca1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ABC1 Anticorpo (AC10): sc-53482
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ABC1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-418929-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABC1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-418929-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Abca1 de camundongo codifica o transportador ABC1 da família dos transportadores cassette de ligação a ATP (ABC), um regulador-chave do efluxo celular de colesterol e fosfolipídios para a apolipoproteína A-I e para HDL nascente. Ao coordenar a exportação de lipídios a partir de macrófagos e de outras células periféricas, o ABC1 sustenta o transporte reverso de colesterol e influencia a composição de microdomínios de membrana, a sinalização inflamatória e a homeostase mitocondrial. A atividade de Abca1 se intersecciona com programas de metabolismo lipídico controlados por LXR/RXR e impacta a formação de células espumosas e o manejo de lipídios nos tecidos. A desregulação do efluxo dependente de Abca1 é amplamente utilizada para modelar processos aterogênicos, fenótipos neuroinflamatórios e respostas ao estresse metabólico em sistemas murinos.
ABC1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Abca1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Abca1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Abca1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Abca1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.