非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
A20 抗体 (A-12): sc-166692. 对 Jurkat (A) 和 BC3H1 (B) 全细胞裂解液以及 NIH/3T3 (C) 和 KNRK (D) 核提取物中 A20 的表达进行 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
A20/TNFAIP3双切口酶质粒(m): sc-423436-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- A20/TNFAIP3 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- A20/TNFAIP3双切酶质粒（m）和A20/TNFAIP3双切酶质粒（m2）编码针对Tnfaip3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：A20/TNFAIP3: sc-166692，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
A20/TNFAIP3双切口酶质粒(m) | sc-423436-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
A20/TNFAIP3双切口酶质粒(m2) | sc-423436-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Tnfaip3 编码 A20/TNFAIP3，这是一种具有泛素编辑功能的酶，是炎症信号传导的核心负调控因子。A20 通过调控关键传导适配蛋白上的 K63 和 M1 连接型泛素链，限制 TNFR、IL‑1R 以及 Toll 样受体等受体下游的 NF‑κB 与 MAPK 通路激活。通过控制细胞因子驱动的转录程序，A20 影响先天与适应性免疫稳态、细胞存活以及应激反应。在自身免疫、慢性炎症和致癌信号等模型中，A20 活性失调与疾病相关表型有关，其中持续性的 NF‑κB 激活是重要致病因素之一。
A20/TNFAIP3 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Tnfaip3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Tnfaip3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Tnfaip3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Tnfaip3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。