A-FABP 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400756-NIC

FABP4는 지방세포 지방산 결합 단백질(A-FABP)을 암호화하며, A-FABP는 장쇄 지방산에 결합해 대사 및 신호전달 경로로의 이동(트래픽킹)을 조절하는 세포질 내 지질 샤페론입니다. 사람의 지방세포와 대식세포에서 A-FABP는 PPAR 신호전달, 염증성 유전자 발현, 세포 스트레스 반응을 포함한 전사 프로그램과 지질 처리 과정을 통합하여, 영양 상태를 면역-대사적 표현형과 연결합니다. FABP4 발현의 변화는 지방세포 분화(adipogenesis) 이상, 인슐린 감수성 저하, 대식세포 활성화의 이상과 연관되어 왔으며, 그 결과 비만 관련 염증과 심대사 기능장애를 연구할 때 널리 사용되는 표지자이자 기전적 핵심 노드로 여겨집니다. 또한 A-FABP는 지질 매개 신호전달의 조절자로서, 지질 대사, 사이토카인 생성, 세포 분화 상태 간의 상호작용을 규명하는 데에도 중요합니다.

A-FABP 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 FABP4 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 FABP4 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 FABP4의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, FABP4 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.