Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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3β-HSD 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400825-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- 3β-HSD Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- 3β-HSD 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 3β-HSD 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 HSD3B1을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
3β-HSD 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-400825-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
3β-HSD 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-400825-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSD3B1은 3β-하이드록시스테로이드 탈수소효소/Δ5-Δ4 이성질화효소 1형(3β-HSD)을 암호화한다. 이는 소포체(미소체) 막에 존재하는 효소로, Δ5-3β-하이드록시스테로이드를 Δ4-케토스테로이드 산물로 전환함으로써 스테로이드 생성(steroidogenesis)의 핵심 단계들을 촉매한다. 여기에는 프레그넬로론을 프로게스테론으로, 디하이드로에피안드로스테론(DHEA)을 안드로스텐디온으로 전환하는 반응이 포함된다. 이러한 반응을 통해 안드로겐, 에스트로겐, 글루코코르티코이드, 미네랄로코르티코이드 생합성 경로로의 대사 흐름을 조절하고, 세포 내 스테로이드 호르몬의 이용 가능성에 영향을 미친다. HSD3B1의 활성 또는 발현이 변화하면 인트라크린(intracrine) 스테로이드 대사가 이동할 수 있으며, 호르몬 의존적 신호전달과 분화가 교란되는 상황(내분비 및 생식생물학, 호르몬 반응성 질환 모델 등)에서 연구되고 있다.
3β-HSD 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 HSD3B1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 HSD3B1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 HSD3B1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, HSD3B1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.