Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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17β-HSD Plasmide Double Nickase (h): sc-402072-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- 17β-HSD Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il 17β-HSD Double Nickase Plasmid (h) e il 17β-HSD Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HSD17B1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: 17β-HSD Antibody (D-8): sc-373902
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
17β-HSD Plasmide Double Nickase (h) | sc-402072-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
17β-HSD Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402072-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSD17B1 umano codifica la 17β-HSD (17β-idrossisteroide deidrogenasi di tipo 1), una ossidoreduttasi chiave che catalizza la conversione dell'estrone nel più potente estrogeno estradiolo e contribuisce all'omeostasi locale degli ormoni steroidei. Regolando l'equilibrio estrogeni/androgeni, la 17β-HSD si integra nelle vie di segnalazione steroidogeniche ed endocrine che influenzano programmi trascrizionali deputati al controllo di proliferazione, differenziamento e metabolismo cellulare. Alterazioni dell'attività o dell'espressione di HSD17B1 sono state associate a patofisiologia ormono-dipendente e a una segnalazione estrogenica deregolata in molteplici tessuti. Di conseguenza, HSD17B1 è ampiamente studiato in modelli di metabolismo degli steroidi, regolazione genica mediata da recettori e meccanismi di malattie legate al sistema endocrino.
17β-HSD Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HSD17B1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HSD17B1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HSD17B1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HSD17B1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.