非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
γB-结晶素抗体 (D-5): sc-377056. EOC 20 (A), ARPE-19 (B), HL-60 (C) 和 Y79 (D) 全细胞裂解液中 γB-crystallin 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
γB-crystallin双切口酶质粒(h): sc-402939-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- γB-crystallin 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- γB-crystallin双切酶质粒（h）和γB-crystallin双切酶质粒（h2）编码针对CRYGB的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：γB-crystallin: sc-377056，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
γB-crystallin双切口酶质粒(h) | sc-402939-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
γB-crystallin双切口酶质粒(h2) | sc-402939-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRYGB 编码人源 γB-晶状体蛋白（γB-crystallin），这是一种在眼晶状体中含量极高、寿命很长的结构蛋白。它通过稳定的 β/γ-晶状体蛋白结构域架构，维持晶状体的折射率与组织透明性。γB-晶状体蛋白参与晶状体纤维细胞的蛋白质稳态（proteostasis）以及晶状体蛋白复合体的空间组织；其溶解度、聚集倾向或翻译后修饰的变化都可能改变光散射。晶状体蛋白稳态的破坏与白内障的发生机制密切相关，因此 CRYGB 是研究晶状体相关细胞模型中蛋白质稳定性、相分离/相态行为以及应激反应的一个有用切入点。对 CRYGB 的实验研究有助于阐明蛋白质在衰老与氧化条件下的聚集机制以及光学性质维持机制。
γB-crystallin 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CRYGB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CRYGB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CRYGB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CRYGB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。