Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
β-TrCP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400971
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β-TrCP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico β-TrCP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:β-TrCP Anticorpo (C-6): sc-390629
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β-TrCP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400971 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
BTRC codifica a proteína F-box β‑TrCP, um componente de reconhecimento de substratos do complexo de ubiquitina ligase E3 SCF (SKP1–CUL1–F-box), que direciona motivos degron fosforilados para ubiquitinação e degradação pelo proteassoma. A β‑TrCP regula múltiplos eixos de sinalização, incluindo a via de NF‑κB por meio da degradação de IκB, a via Wnt/β‑catenina por meio da degradação de β‑catenina e o controle do ciclo celular ao modular proteínas como CDC25A e EMI1. Por essas vias, BTRC influencia a proliferação, respostas inflamatórias, a adaptação ao dano no DNA e programas epitélio–mesênquima. A atividade desregulada de β‑TrCP tem sido associada à ativação aberrante de vias e à instabilidade genômica em diversos contextos de pesquisa em câncer e doenças/condições relacionadas ao sistema imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO β-TrCP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BTRC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BTRC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BTRC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína β-TrCP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BTRC para a investigação da sinalização de β-TrCP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BTRC críticos para a função β-TrCP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BTRC para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo β-TrCP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo β-TrCP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BTRC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo β-TrCP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR β-TrCP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BTRC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BTRC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.