Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
β-glucosidase Antibody (A-16): sc-100544. Western blot analysis of β-glucosidase expression in non-transfected 293T: sc-117752 (A), human β-glucosidase transfected 293T: sc-110483 (B) and MCF7 (C) whole cell lysates.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
β-glucosidase双切口酶质粒(h): sc-417618-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- β-glucosidase 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- β-glucosidase双切酶质粒（h）和β-glucosidase双切酶质粒（h2）编码针对GBA的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：β-glucosidase: sc-166407，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
β-glucosidase双切口酶质粒(h) | sc-417618-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
β-glucosidase双切口酶质粒(h2) | sc-417618-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GBA 编码人 β-葡萄糖苷酶（葡糖脑苷脂酶，glucocerebrosidase），这是一种溶酶体水解酶，可将葡糖基神经酰胺（glucosylceramide）裂解为神经酰胺（ceramide）和葡萄糖，从而支持鞘脂周转并维持膜脂稳态。该酶在内体-溶酶体通路中发挥作用，并与溶酶体生物发生及自噬相关过程相互联系，从而影响细胞蛋白质稳态。GBA 活性受损会导致糖脂底物堆积和溶酶体功能障碍，这是戈谢病（Gaucher disease）生物学中的核心机制。GBA 变异也因其与突触核蛋白病（synucleinopathy）相关通路的关联而被广泛研究，推动了在神经元和髓系细胞模型系统中的机制性研究。
β-glucosidase 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GBA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GBA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GBA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GBA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。