βB1-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403361-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- βB1-crystallinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase βB1-crystallin (h) e o Plasmídeo Double Nickase βB1-crystallin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CRYBB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:βB1-crystallin Anticorpo (A-8): sc-374496
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
βB1-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403361-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
βB1-crystallin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403361-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRYBB1 codifica a βB1-cristalina humana, uma importante proteína estrutural do cristalino que contribui para o alto índice de refração e a transparência de longo prazo necessários para a visão. A βB1-cristalina participa da rede de proteínas cristalinas ao formar oligômeros estáveis com outras β/γ-cristalinas, sustentando a arquitetura das células das fibras do cristalino e a homeostase proteica. A ruptura da montagem das cristalinas ou o aumento da suscetibilidade à agregação podem comprometer a nitidez do cristalino, tornando o CRYBB1 um locus-chave para estudar proteostase, respostas ao estresse e alterações relacionadas ao envelhecimento na biologia do cristalino. Variantes que afetam a estabilidade e a solubilidade da βB1-cristalina foram associadas a fenótipos hereditários de catarata, fornecendo um contexto genético para estudos mecanísticos em modelos oculares.
βB1-crystallin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CRYBB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CRYBB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CRYBB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CRYBB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.