Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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βA4-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419824
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- βA4-crystallin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico βA4-crystallin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
βA4-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419824 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cryba4 codifica a βA4-cristalina, uma importante cristalina estrutural do cristalino ocular de camundongos, que contribui para as propriedades refrativas e para a transparência do cristalino a longo prazo. Como membro da superfamília das β/γ-cristalinas, a βA4-cristalina participa da diferenciação das células das fibras do cristalino e da formação de conjuntos proteicos densamente empacotados e altamente ordenados, que mantêm a homogeneidade óptica. Sua estabilidade e suas interações nas redes de cristalinas influenciam processos de homeostase proteica, como o dobramento assistido por chaperonas e a proteção contra agregação sob estresse oxidativo e associado ao envelhecimento. A ruptura ou desregulação da composição das cristalinas está ligada a fenótipos de opacificação do cristalino, sustentando Cryba4 como um locus relevante para mecanismos relacionados à catarata e para estudos do desenvolvimento ocular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO βA4-crystallin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cryba4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cryba4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cryba4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína βA4-crystallin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cryba4 para a investigação da sinalização de βA4-crystallin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cryba4 críticos para a função βA4-crystallin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cryba4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo βA4-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo βA4-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cryba4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo βA4-crystallin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR βA4-crystallin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cryba4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cryba4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.