β6 Tubulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400062

概要

TUBB6はヒトのβ6チューブリンをコードしており、αチューブリンとヘテロ二量体を形成して微小管を構築するβチューブリンのアイソタイプです。微小管は細胞骨格の構造維持と細胞内輸送を支えます。チューブリンのアイソタイプ組成によって規定される微小管動態は、有糸分裂紡錘体の形成、染色体分配、細胞周期の進行を制御し、さらに細胞極性や細胞運動性の形成にも関与します。β6チューブリンは、微小管関連タンパク質やモーター複合体との相互作用を介して、小胞輸送およびオルガネラの配置を制御する経路に関与します。チューブリンネットワークや微小管挙動の異常は、増殖形質、染色体不安定性、移動プログラムの変化と関連し、がん生物学やその他の細胞骨格関連疾患との関係が示唆されています。

β6 Tubulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTUBB6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TUBB6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TUBB6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、β6 Tubulinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、β6 Tubulinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TUBB6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• β6 Tubulinの機能に不可欠なTUBB6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TUBB6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• β6 Tubulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびβ6 Tubulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TUBB6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  β6 Tubulin HDRプラスミド（h）および β6 Tubulin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTUBB6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTUBB6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。