α1B-AR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403295-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1B-ARO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase α1B-AR (h) e o Plasmídeo Double Nickase α1B-AR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADRA1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1B-AR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403295-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α1B-AR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403295-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADRA1B codifica o recetor adrenérgico humano α1B (α1B-AR), um recetor acoplado à proteína G que se associa preferencialmente a Gq/11 para estimular a sinalização da fosfolipase C, a produção de fosfatos de inositol, a mobilização de Ca2+ intracelular e a ativação da proteína quinase C. Por meio destas vias, o α1B-AR influencia o tónus do músculo liso vascular, a neurotransmissão e a regulação simpática mais ampla da excitabilidade e da contratilidade celulares, com ativação a jusante de MAPK/ERK e de outras redes de sinalização responsivas ao stress. Alterações na sinalização dos recetores adrenérgicos têm sido implicadas na biologia cardiovascular e neuropsiquiátrica, tornando o ADRA1B um locus útil para estudos mecanísticos de sinalização de GPCR, dessensibilização/internalização de recetores e respostas enviesadas de via em modelos celulares relevantes.
α1B-AR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADRA1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADRA1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADRA1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADRA1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.