ZRSR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423571

概要

Zrsr2は、亜鉛フィンガー型のRNA結合タンパク質であるZRSR2をコードしており、スプライソソームの中核構成因子として機能します。特にU12型イントロンの認識と除去に重要な役割を担います。ZRSR2はpre-mRNAスプライシングの忠実性を制御することで、転写産物アイソフォームの選択や、細胞周期制御・分化・ストレス応答に関与する遺伝子の発現に影響を与えます。ZRSR2依存的なマイナースプライソソーム活性が破綻すると、異常なイントロン保持や広範なRNAプロセシング異常が生じ得るため、この経路は疾患に関連する状況における造血系および免疫細胞プログラムの変化と結び付けられています。保存性の高いスプライシング因子として、マウスZRSR2はスプライソソームの組み立て機構、マイナーイントロン生物学、ならびに下流のプロテオーム再編成を解明する機構研究に有用です。

ZRSR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZrsr2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zrsr2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zrsr2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZRSR2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZRSR2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zrsr2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZRSR2の機能に不可欠なZrsr2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zrsr2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZRSR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびZRSR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zrsr2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZRSR2 HDRプラスミド（m）および ZRSR2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZrsr2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZrsr2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。