ZNF580 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406194

概要

ZNF580は、KRABドメインを含むC2H2型ジンクフィンガータンパク質で、主に転写調節因子として機能し、配列特異的なDNA結合を、遺伝子発現プログラムを形作るクロマチン修飾複合体へと結び付けます。血管内皮細胞の遊走や血管新生応答を含む内皮細胞の挙動の制御、ならびに酸化ストレスおよび炎症性シグナル伝達の出力調整への関与が示唆されています。これらの調節作用を通じて、ZNF580は血管リモデリング、細胞周期進行、ストレス応答性転写を司る経路に影響を及ぼし得ます。ZNF580の発現または活性の破綻は、動脈硬化関連プロセスや虚血に伴う内皮機能障害などの血管病態の文脈と関連づけられており、血管生物学の機構研究に有用な標的（ノード）となります。

ZNF580 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZNF580遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZNF580内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZNF580のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZNF580タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZNF580シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZNF580欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZNF580の機能に不可欠なZNF580エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZNF580ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZNF580 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZNF580 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZNF580遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZNF580 HDRプラスミド（h）および ZNF580 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZNF580ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZNF580標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。