ZCCHC11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411714

概要

ZCCHC11（TUT4としても知られる）は、亜鉛フィンガーCCHC型のRNAウリジリルトランスフェラーゼをコードしており、前駆体および成熟マイクロRNAや一部のmRNAなど、多様なRNA基質に対して3′末端のウリジル化を触媒します。RNAの3′末端を修飾することで、ZCCHC11はRNAの安定性や分解経路、miRNA生合成、転写後の遺伝子発現制御に影響を及ぼし、LIN28依存的なlet-7ファミリーmiRNAの制御とも機能的に連携しています。この活性により、ZCCHC11は分化・増殖・ストレス応答性のトランスクリプトーム再編成を司る制御プログラムと結び付けられます。ZCCHC11の発現や活性の破綻は、異常なmiRNAネットワークやがん遺伝子シグナルの文脈で研究されており、がん生物学およびRNA代謝の機構解明研究において重要です。

ZCCHC11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZCCHC11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZCCHC11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZCCHC11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZCCHC11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZCCHC11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZCCHC11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZCCHC11の機能に不可欠なZCCHC11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZCCHC11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZCCHC11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZCCHC11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZCCHC11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZCCHC11 HDRプラスミド（h）および ZCCHC11 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZCCHC11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZCCHC11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。