Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ZAG (m): sc-419279
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ZAG Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ZAG, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ZAG Antibody (F-6): sc-271957
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ZAG (m) | sc-419279 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Azgp1 code la zinc-α2-glycoprotéine (ZAG), une glycoprotéine sécrétée de type adipokine exprimée dans de nombreux tissus, qui contribue à la mobilisation systémique des lipides et à l’équilibre énergétique. Dans les réseaux métaboliques murins, la ZAG a été associée à la régulation de la lipolyse des adipocytes, à la modulation de l’utilisation des acides gras et aux interactions avec la signalisation inflammatoire dans les microenvironnements du tissu adipeux et du foie. Les modifications d’expression d’Azgp1/ZAG sont fréquemment étudiées dans le contexte des dysfonctionnements métaboliques liés à l’obésité et des variations de sensibilité à l’insuline, ainsi que dans des phénotypes plus larges liés à la cachexie et à l’inflammation. En tant que facteur circulant et associé à la matrice extracellulaire, la ZAG est également pertinente pour l’étude du remodelage tissulaire et de la communication intercellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ZAG (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Azgp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Azgp1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Azgp1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ZAG.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Azgp1 pour l'étude de la signalisation de ZAG, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Azgp1 essentiels à la fonction de ZAG
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Azgp1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ZAG plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ZAG plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Azgp1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ZAG plasmide HDR (m) et le ZAG (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Azgp1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Azgp1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.