Xanthine Oxidase CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401185

概要

ヒトXDHはキサンチンオキシダーゼをコードしており、モリブデン依存性酵素として、ヒポキサンチンをキサンチンへ、さらにキサンチンを尿酸へと変換することで、プリン分解代謝の最終段階を触媒します。これらの反応の過程で活性酸素種（ROS）を産生し得るため、プリン代謝はレドックス恒常性や酸化ストレスシグナル伝達と結び付けられます。キサンチンオキシダーゼ活性は、内皮機能、炎症応答、代謝適応に影響を及ぼし、その破綻は、高尿酸血症に関連する生物学、虚血—再灌流障害の機序、ならびに心代謝疾患に関わる酸化関連経路と関連づけられてきました。XDHはまた、肝代謝および全身の窒素バランスの観点からも研究されており、プリン代謝回転の変化が細胞のストレス応答を組み替え得ることが示唆されています。

Xanthine Oxidase CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるXDH遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、XDH内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、XDHのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Xanthine Oxidaseタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Xanthine Oxidaseシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、XDH欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Xanthine Oxidaseの機能に不可欠なXDHエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、XDHゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Xanthine Oxidase CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびXanthine Oxidase CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、XDH遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Xanthine Oxidase HDRプラスミド（h）および Xanthine Oxidase HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはXDHホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のXDH標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。