Wnt-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423711

概要

Wnt11 は分泌性リガンドである Wnt-11 をコードしており、発生過程における細胞極性、方向性移動、組織形態形成を制御する非カノニカル Wnt シグナル伝達の重要な調節因子です。Wnt-11 は一般に、平面内細胞極性（PCP）経路および Wnt/Ca²⁺ 経路を介してシグナルを伝え、Frizzled や ROR などの受容体を介して細胞骨格動態やカルシウム依存的な転写プログラムに影響を与えます。マウスの系では、Wnt-11 活性は心臓や頭蓋顔面のパターニングを含む器官形成過程と関連しており、状況依存的に β-カテニン依存性シグナルとも交差し得ます。Wnt11 シグナルの破綻は、異常な形態形成、細胞運動プログラムの変化、ならびに線維化やがん生物学モデルに関連する表現型と結び付けて報告されています。

Wnt-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるWnt11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Wnt11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Wnt11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Wnt-11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Wnt-11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Wnt11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Wnt-11の機能に不可欠なWnt11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Wnt11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Wnt-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびWnt-11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Wnt11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Wnt-11 HDRプラスミド（m）および Wnt-11 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはWnt11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のWnt11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。