Plasmide CRISPR/Cas9 KO Wnt-11 (m): sc-423711
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Wnt-11 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Wnt-11, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Wnt-11 Antibody (C-8): sc-365032
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Wnt-11 (m) | sc-423711 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Wnt11 code pour le ligand sécrété Wnt-11, un modulateur clé de la signalisation Wnt non canonique qui façonne la polarité cellulaire, la migration directionnelle et la morphogenèse tissulaire au cours du développement. Wnt-11 transmet couramment son signal via les voies de polarité planaire (PCP) et Wnt/Ca²⁺, en mobilisant des récepteurs tels que Frizzled et ROR afin d’influencer la dynamique du cytosquelette et des programmes transcriptionnels dépendants du calcium. Dans les modèles murins, l’activité de Wnt-11 est liée à des processus d’organogenèse, notamment la formation du cœur et la mise en place des structures craniofaciales, et elle peut interagir avec la signalisation dépendante de la β-caténine de manière spécifique au contexte. Une dérégulation de la signalisation Wnt11 a été associée à une morphogenèse anormale, à des modifications des programmes de motilité cellulaire et à des phénotypes pertinents pour des modèles de biologie de la fibrose et du cancer.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Wnt-11 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Wnt11 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Wnt11, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Wnt11 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Wnt-11.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Wnt11 pour l'étude de la signalisation de Wnt-11, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Wnt11 essentiels à la fonction de Wnt-11
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Wnt11 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Wnt-11 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Wnt-11 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Wnt11. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Wnt-11 plasmide HDR (m) et le Wnt-11 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Wnt11 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Wnt11 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.