Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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VPS35 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402019-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VPS35O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VPS35 (h) e o Plasmídeo Double Nickase VPS35 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VPS35. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VPS35 Anticorpo (B-5): sc-374372
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VPS35 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402019-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VPS35 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402019-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VPS35 codifica um componente central do complexo retromer seletivo de carga, que coordena a recuperação do endossomo para o Golgi e a reciclagem endossomal de proteínas transmembranares. Ao interagir com sorting nexins e com a remodelação de actina dependente de WASH, a VPS35 ajuda a regular o tráfego de recetores, a homeostase lisossomal e o equilíbrio entre as vias de reciclagem e de degradação. A disrupção da função de VPS35 perturba a dinâmica endolisossomal e a proteostase, afetando a composição de proteínas de membrana à superfície celular e ao longo da via secretora. Estudos genéticos e funcionais associaram alterações na atividade de VPS35 a mecanismos neurodegenerativos, particularmente a vias que convergem na manutenção sináptica, no controlo de qualidade mitocondrial e na suscetibilidade à agregação de proteínas.
VPS35 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VPS35 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VPS35. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VPS35. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VPS35 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.