VDAC3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423663

概要

Vdac3 は、ミトコンドリア外膜に存在するβバレル型の孔タンパク質である電位依存性陰イオンチャネル3（VDAC3）をコードしており、細胞質とミトコンドリア間の代謝産物およびイオンの交換を調節する。VDACファミリーの一員として、VDAC3は酸化的リン酸化の共役、ミトコンドリア膜電位の維持、ならびにレドックス感受性のミトコンドリア恒常性制御に寄与する。VDAC3に関連する過程は、アポトーシスシグナル、活性酸素種（ROS）の制御、そして細胞のストレス応答を形作るミトコンドリア品質管理経路と交差している。VDAC3機能の変化は、エネルギー代謝の不均衡や、代謝性疾患・神経変性疾患の機序に関連する組織特異的な異常を含む、ミトコンドリア機能障害の文脈で研究されてきた。

VDAC3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるVdac3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Vdac3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Vdac3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、VDAC3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、VDAC3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Vdac3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• VDAC3の機能に不可欠なVdac3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Vdac3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• VDAC3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびVDAC3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Vdac3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  VDAC3 HDRプラスミド（m）および VDAC3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVdac3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVdac3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。