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VDAC1/Porin双切口酶质粒(h) | sc-418200-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VDAC1/Porin双切口酶质粒(h2) | sc-418200-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VDAC1(电压依赖性阴离子通道1),又称孔蛋白(porin),是线粒体外膜上的主要通道,介导ATP/ADP、离子及关键代谢物在线粒体与细胞质之间的交换。通过调控外膜通透性并协调与己糖激酶及BCL-2家族蛋白的相互作用,VDAC1将细胞能量代谢与凋亡信号、钙稳态和氧化还原平衡整合在一起。VDAC1的功能与氧化磷酸化、糖酵解耦联以及线粒体相关膜(MAM)过程相交织,这些过程共同塑造线粒体动力学与应激反应。VDAC1表达或通道活性的失调与生物能量学改变及线粒体功能障碍相关,而这些现象在癌症生物学、神经退行性疾病与代谢性疾病研究中均有观察到。
VDAC1/Porin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 VDAC1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对VDAC1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏VDAC1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了VDAC1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。