VCX-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-416596

概要

VCX3BはVCX-Cをコードしており、VCX/Yタンパク質ファミリーの一員です。このファミリーは男性の生殖系列組織で高発現し、精巣特異的な転写プログラムと関連しています。精子形成において、本ファミリーのタンパク質はmRNAの取り扱いおよび転写後制御の調節に関与すると考えられており、VCX-CはRNA代謝や生殖細胞の分化といった過程に結び付けられます。VCX3Bはコピー数変動が繰り返し生じるX染色体領域に位置するため、遺伝子量（dosage）感受性やゲノム安定性の研究において重要です。VCXファミリー遺伝子の制御異常は、男性不妊の表現型やX連鎖のゲノム再編成との関連で検討されており、生殖・発生生物学モデルにおける機構解明研究を支持します。

VCX-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるVCX3B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、VCX3B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、VCX3Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、VCX-Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、VCX-Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、VCX3B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• VCX-Cの機能に不可欠なVCX3Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、VCX3Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• VCX-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびVCX-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、VCX3B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  VCX-C HDRプラスミド（h）および VCX-C HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVCX3Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVCX3B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。