USP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406837-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase USP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase USP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para USP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406837-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406837-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A USP1 humana codifica uma enzima desubiquitinante que regula a estabilidade do genoma ao reverter eventos de monoubiquitinação na via de reparo de DNA da anemia de Fanconi, incluindo a desubiquitinação de FANCD2/FANCI. Em coordenação com a UAF1, a USP1 modula a sinalização de dano ao DNA durante a fase S e influencia a escolha e a eficiência de mecanismos de reparo como a recombinação homóloga e a síntese de DNA por translesão. A atividade da USP1 também afeta as respostas ao estresse de replicação e o controle dos checkpoints do ciclo celular ao ajustar a renovação de proteínas dependente de ubiquitina. A desregulação da função da USP1 tem sido associada a capacidade alterada de reparo de DNA, instabilidade cromossômica e fenótipos oncogênicos em múltiplos contextos tumorais, tornando-a um alvo frequente em estudos mecanísticos de manutenção do genoma.
USP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus USP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de USP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função USP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com USP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.