USF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401713

概要

USF2は、Eボックスモチーフに結合して基礎的および刺激応答性の遺伝子発現を調節する、広く発現するbHLH-ロイシンジッパー型転写因子である上流刺激因子2（USF-2）をコードします。USF-2は、プロモーター構造とクロマチン環境を協調的に制御することにより、代謝恒常性、細胞周期の進行、分化、ストレス応答の転写制御に関与します。その活性は、グルコースおよび脂質代謝、炎症シグナル、酸化ストレスを制御する経路と交差し、腫瘍生物学に関連する転写プログラムにも影響し得ます。USF2の発現や機能の変化は、増殖制御の破綻や代謝表現型の異常と関連づけられており、転写ネットワークの再編を機序的に研究するうえで有用な結節点となります。

USF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUSF2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、USF2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、USF2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、USF-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、USF-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、USF2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• USF-2の機能に不可欠なUSF2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、USF2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• USF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびUSF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、USF2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  USF-2 HDRプラスミド（h）および USF-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUSF2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUSF2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。