UPase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423623

개요

마우스 Upp1은 유리딘 인산분해효소(uridine phosphorylase, UPase)를 암호화하며, 이는 피리미딘 구제(salvage) 경로의 핵심 효소로서 유리딘을 유라실과 리보스-1-인산으로 가역적으로 인산분해(phosphorolysis)하는 반응을 촉매한다. UPase는 세포 내 뉴클레오사이드 풀을 조절함으로써 RNA/DNA 전구체의 이용 가능성에 영향을 주고, 증식과 대사 적응을 뒷받침하는 뉴클레오타이드 대사 프로그램과 통합되어 작동한다. Upp1 발현과 UPase 활성은 뉴클레오사이드 턴오버의 변화가 세포 항상성을 바꿀 수 있는 조직 리모델링 및 스트레스 반응 맥락에서 연구되어 왔다. 대사적 결절점으로서 Upp1은 피리미딘 대사와 미토콘드리아 및 산화환원(redox) 균형, 그리고 성장·생존 표현형에 영향을 미치는 경로 간 크로스토크의 연계를 규명하는 데 자주 활용된다.

UPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Upp1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Upp1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Upp1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UPase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UPase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Upp1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UPase 기능에 중요한 Upp1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Upp1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 UPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Upp1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UPase HDR 플라스미드 (m) 및 UPase HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Upp1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Upp1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.