UGT2B10 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-404210-ACT

UGT2B10 は、内因性および外因性（キセノバイオティクス）基質のグルクロン酸抱合を触媒し、第II相代謝を通じた排泄のためにそれらの溶解性を高めるヒトUDP-グルクロン酸転移酵素をコードします。この小胞体関連酵素は、酸化ストレス応答や薬物処理経路と連携する肝臓および肝外の解毒ネットワークに寄与します。UGT2B10 の発現量や活性の違いは、特定のアミン類やその他化合物の代謝における個人差と関連づけられており、曝露プロファイルやバイオマーカー測定値に影響を与えます。そのため、UGT2B10 は薬理ゲノミクス、ケミカルバイオロジー、ならびに肝機能と代謝恒常性のモデル研究において頻繁に検討されています。

UGT2B10 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性UGT2B10の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

UGT2B10 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における UGT2B10 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はUGT2B10転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性UGT2B10の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のUGT2B10遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるUGT2B10依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびUGT2B10発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるUGT2B10経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。