UBXD7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432436

概要

Ubxn7はUBXD7をコードしており、UBXドメインを含むアダプターとして、ユビキチン依存的な基質処理をp97/VCP ATPアーゼ機構へと結び付けます。UBXD7は、ユビキチン鎖の認識を調節し、ER関連分解（ERAD）や、停止・損傷したタンパク質複合体の品質管理などの経路におけるユビキチン化タンパク質の処理を促進することで、プロテオスタシスに関与します。これらの機能を通じてUBXD7は、細胞ストレス応答、タンパク質ターンオーバー、ならびにユビキチン–プロテアソーム系の動態に結び付いたシグナル伝達の帰結に影響を与えます。p97/VCPを中心とするプロテオスタシス・ネットワークの破綻は、神経変性やがんに伴う脆弱性と広く関連するため、Ubxn7はマウスモデルにおける機構解析研究の有用な結節点となります。

UBXD7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUbxn7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ubxn7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ubxn7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UBXD7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UBXD7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ubxn7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UBXD7の機能に不可欠なUbxn7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ubxn7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UBXD7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびUBXD7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ubxn7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UBXD7 HDRプラスミド（m）および UBXD7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUbxn7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUbxn7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。