Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ubr4 (h): sc-408481
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Ubr4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Ubr4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ubr4 Antibody (21-Y): sc-100615
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ubr4 (h) | sc-408481 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
UBR4 humain code l’E3 ubiquitine‑ligase Ubr4, une grande protéine cytosolique qui contribue au contrôle qualité des protéines et à leur renouvellement dépendants de l’ubiquitine. Ubr4 est associée à la voie de la règle du N‑terminal (N‑end rule) et, plus largement, aux programmes de protéostasie qui influencent la stabilité des protéines, leur trafic et le remodelage adaptatif du protéome cellulaire en situation de stress. Par ces fonctions, UBR4 peut affecter des processus tels que l’endocytose, la régulation de protéines liées au cycle cellulaire et les réponses au stress protéotoxique. La dérégulation de la signalisation par l’ubiquitine et de la protéostasie a été associée à des phénotypes neurodégénératifs et à des états cellulaires liés au cancer, faisant d’UBR4 un nœud utile pour des études mécanistiques du câblage des voies de l’ubiquitine.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ubr4 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène UBR4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du UBR4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert UBR4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ubr4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en UBR4 pour l'étude de la signalisation de Ubr4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de UBR4 essentiels à la fonction de Ubr4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de UBR4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Ubr4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Ubr4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus UBR4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Ubr4 plasmide HDR (h) et le Ubr4 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie UBR4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles UBR4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.