UBE2O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410610
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UBE2O O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico UBE2O, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UBE2O Anticorpo (2C10): sc-293246
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UBE2O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-410610 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
UBE2O codifica uma enzima híbrida E2/E3 de conjugação de ubiquitina que medeia a transferência de ubiquitina para proteínas substrato, ligando a ubiquitinação à proteostase e ao controlo de qualidade das proteínas. Participa na regulação de vias associadas à tradução, na remodelação de complexos proteicos responsiva ao stress e em transições de estado celular, ao direcionar proteínas selecionadas para degradação dependente de ubiquitina. Pelo seu impacto na sinalização por ubiquitina e na estabilidade de reguladores-chave, a UBE2O tem sido estudada em contextos que incluem alterações da homeostase do proteoma, adaptação metabólica e programas associados ao ciclo celular ou à diferenciação. A atividade desregulada da UBE2O e a dinâmica de ubiquitinação são frequentemente investigadas no cancro e noutras doenças caracterizadas por perturbações na degradação proteica e nas respostas ao stress.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UBE2O (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene UBE2O em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do UBE2O, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do UBE2O na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UBE2O.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de UBE2O para a investigação da sinalização de UBE2O, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) UBE2O críticos para a função UBE2O
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos UBE2O para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo UBE2O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo UBE2O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus UBE2O. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo UBE2O Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR UBE2O (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia UBE2O para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo UBE2O definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.