UBC12 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423575

개요

Ube2m은 컬린 스캐폴드에 NEDD8을 전달하는 E2 결합 효소인 UBC12를 암호화하며, 이를 통해 컬린–RING 유비퀴틴 리가아제(CRL)의 활성화를 가능하게 하고 단백질 항상성(proteostasis)을 광범위하게 조절합니다. CRL 의존적 유비퀴틴화의 조절을 통해 UBC12는 핵심 조절 단백질의 분해(턴오버)를 조정함으로써 세포주기 진행, DNA 손상 반응, 신호 전달, 스트레스 적응에 영향을 미칩니다. 네딜레이션(neddylation)의 교란은 단백질 항상성과 체크포인트 조절을 무너뜨릴 수 있으며, 그 결과 Ube2m/UBC12 기능은 암 생물학, 신경생물학, 염증 신호전달에서 빈번히 연구되는 경로들과 연관됩니다. 마우스 시스템에서 Ube2m 기능상실 연구는 유비퀴틴 유사(ubiquitin-like) 변형 네트워크의 기전적 분석과, 이들이 조직 발달 및 질병 관련 표현형에 기여하는 바를 규명하는 데 도움을 줍니다.

UBC12 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ube2m 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ube2m 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ube2m의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UBC12 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UBC12 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ube2m 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UBC12 기능에 중요한 Ube2m 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ube2m 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UBC12 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 UBC12 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ube2m 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UBC12 HDR 플라스미드 (m) 및 UBC12 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ube2m 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ube2m 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.