Date published: 2026-7-15

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Tyrosinase Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423566-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • TyrosinaseO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase Tyrosinase (m) e o Plasmídeo Double Nickase Tyrosinase (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tyr. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Tyrosinase Anticorpo (T311): sc-20035
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    Tyrosinase Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-423566-NIC
    20 µg
    $410.00

    Tyrosinase Plasmídeo duplo de Nickase (m2)

    sc-423566-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O gene Tyr do camundongo codifica a tirosinase, uma oxidase dependente de cobre que catalisa etapas-chave e limitantes da velocidade na biossíntese de melanina, incluindo a conversão de L-tirosina em DOPA e em DOPAquinona dentro dos melanossomos. A atividade da tirosinase se integra aos programas de diferenciação de melanócitos e às vias de biogênese de organelas que regulam a produção, o tráfego e o armazenamento de pigmento. A perturbação de Tyr afeta a síntese de eumelanina e feomelanina, alterando fenótipos de pigmentação amplamente usados como leituras acessíveis em biologia do desenvolvimento e biologia celular. Como genes da via da melanina influenciam a química oxidativa e respostas celulares ao estresse, Tyr é frequentemente estudado em modelos de variação pigmentar e de distúrbios genéticos relacionados.

    Tyrosinase O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tyr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tyr. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tyr. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tyr interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.