Type I 4-phosphatase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404750-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Type I 4-phosphataseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Type I 4-phosphatase (h) e o Plasmídeo Double Nickase Type I 4-phosphatase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para INPP4A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Type I 4-phosphatase Anticorpo (E-2): sc-390549
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Type I 4-phosphatase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404750-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Type I 4-phosphatase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404750-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INPP4A codifica a 4-fosfatase tipo I, uma fosfatase de inositol polifosfato 4 que hidrolisa o fosfatidilinositol 3,4-bisfosfato em fosfatidilinositol 3-fosfato, remodelando os reservatórios de fosfoinositídeos de membrana. Por meio dessa atividade, modula a dinâmica de sinalização dependente de PI3K, influenciando o recrutamento de efetores com domínio PH, a identidade de membranas endossomais e o controle a jusante de programas de crescimento e sobrevivência celular. A função de INPP4A se cruza com a sinalização mediada por receptores e com processos de tráfego vesicular que coordenam a detecção de nutrientes e as respostas ao estresse. Alterações na regulação de INPP4A e no turnover de PI(3,4)P2 têm sido associadas na literatura a redes de sinalização desreguladas relevantes para a biologia do câncer e a neurobiologia, sustentando estudos mecanísticos de reprogramação de vias.
Type I 4-phosphatase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus INPP4A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de INPP4A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função INPP4A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com INPP4A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.