TSSK 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423531

Visão geral

Tssk1 codifica a quinase 1 específica do testículo de serina/treonina (TSSK1), uma quinase restrita às células germinativas que atua na espermatogênese pós-meiótica. A TSSK1 contribui para processos de diferenciação dos espermatozoides, como a remodelação da cromatina, a montagem do flagelo e a maturação das espermátides, por meio de sinalização dependente de fosforilação no testículo. A disrupção da atividade das quinases da família TSSK tem sido associada a desenvolvimento espermático prejudicado e a fenótipos de subfertilidade/infertilidade masculina em sistemas modelo. Como um gene de camundongo com expressão altamente enriquecida no testículo, o Tssk1 é frequentemente estudado para definir vias reguladas por quinases que controlam o desenvolvimento das células germinativas e a aptidão reprodutiva.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TSSK 1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tssk1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tssk1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tssk1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TSSK 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tssk1 para a investigação da sinalização de TSSK 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tssk1 críticos para a função TSSK 1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tssk1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TSSK 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TSSK 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tssk1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TSSK 1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TSSK 1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tssk1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tssk1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.