TRPC4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423515

개요

Trpc4는 정형(캐노니컬) TRP 계열의 비선택적 양이온 채널인 TRPC4를 암호화하며, GPCR 및 PLC 신호전달 하위에서 수용체-작동성(receptor-operated) 및 저장고-작동성(store-operated) Ca²⁺ 유입을 매개합니다. TRPC4 의존적 Ca²⁺ 유입은 막 탈분극과 칼슘 의존적 전사 프로그램에 기여하여, 내피 장벽 조절, 평활근 수축성, 신경세포 흥분성 등의 과정에 영향을 줍니다. 마우스 시스템에서 TRPC4 활성은 혈관 긴장도와 투과성을 조절하는 경로, 위장관 및 요로 운동성, 시냅스 신호전달 등에서 흔히 연구됩니다. TRPC4와 연계된 칼슘 항상성의 이상은 심혈관, 염증, 신경행동 연구와 관련된 표현형과 연관되어 보고되어 왔으며, 신호전달 및 생리 연구에서 기전적 허브(노드)로서의 활용을 뒷받침합니다.

TRPC4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Trpc4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Trpc4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Trpc4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRPC4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRPC4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Trpc4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRPC4 기능에 중요한 Trpc4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Trpc4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRPC4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TRPC4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Trpc4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRPC4 HDR 플라스미드 (m) 및 TRPC4 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Trpc4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Trpc4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.