TRAPPC10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406491

概要

TRAPPC10は、初期分泌経路およびエンドメンブレン系全体にわたる小胞の係留（テザリング）と膜輸送を支えるTRAPP（transport protein particle）複合体の中核サブユニットをコードしています。小胞輸送やゴルジ体／小胞体（ER）に関連する輸送段階の調整に関与することで、TRAPPC10は細胞内タンパク質のソーティング、オルガネラの恒常性、ならびに正常な細胞生理に必要なカーゴ輸送に寄与します。TRAPP複合体の構成要素が障害されると、分泌経路のフラックスやストレス応答が乱れる可能性があるため、TRAPPC10は輸送依存的なシグナル伝達や細胞維持プログラムの機構研究において重要です。さらに、小胞輸送の異常は神経発生および神経変性の表現型にも関与するとされており、TRAPPC10はヒト細胞における輸送関連疾患メカニズムのモデリングに有用な標的となります。

TRAPPC10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTRAPPC10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TRAPPC10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TRAPPC10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRAPPC10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRAPPC10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TRAPPC10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRAPPC10の機能に不可欠なTRAPPC10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TRAPPC10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRAPPC10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTRAPPC10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TRAPPC10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRAPPC10 HDRプラスミド（h）および TRAPPC10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTRAPPC10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTRAPPC10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。