Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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TRAF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423497
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRAF6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TRAF6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRAF6 Anticorpo (D-10): sc-8409
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRAF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423497 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Traf6 de camundongo codifica a TRAF6, uma ligase E3 de ubiquitina e proteína adaptadora que integra a sinalização a jusante de membros da superfamília dos receptores de TNF e de receptores do tipo Toll/IL-1 para controlar respostas imunes inatas e adaptativas. A TRAF6 catalisa eventos de ubiquitinação ligados a K63 que promovem a montagem dos complexos TAK1 e IKK, impulsionando a sinalização de NF-κB e MAPK e programas transcricionais que regulam inflamação, sobrevivência celular e diferenciação. Ela também é central na sinalização RANK/RANKL na osteoclastogênese e contribui para a regulação da autofagia por meio de scaffolding dependente de ubiquitina. A desregulação da sinalização de TRAF6 tem sido implicada em patologias inflamatórias, defeitos de remodelamento ósseo e contextos de sinalização oncogênica nos quais a ativação de NF-κB/MAPK e a reprogramação da via de ubiquitina são proeminentes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRAF6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Traf6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Traf6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Traf6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRAF6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Traf6 para a investigação da sinalização de TRAF6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Traf6 críticos para a função TRAF6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Traf6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TRAF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TRAF6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Traf6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TRAF6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TRAF6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Traf6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Traf6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.