TMEM132B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414044

概要

TMEM132Bは、TMEM132ファミリーに属する一回膜貫通型タンパク質をコードしており、神経系で高発現し、膜構造の組織化や細胞間／細胞‐細胞外マトリックス（ECM）相互作用に関与するとされています。近年の研究から、TMEM132タンパク質は細胞骨格とのカップリングや接着に関連する過程に関与し、神経突起の伸長、シナプス結合性、細胞形態に影響を及ぼす可能性が示唆されています。TMEM132Bの発現や遺伝的多様性は、神経発達および神経精神疾患の文脈で検討されており、神経回路網の形成と維持を規定する経路の解明において重要な分子であることが支持されています。TMEM132Bの機能を解析することで、膜貫通型の足場（スキャフォールド）機構が、神経分化やストレス応答性リモデリングを制御するシグナル伝達モジュールとどのように連携するかを明らかにできる可能性があります。

TMEM132B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMEM132B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMEM132B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMEM132Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMEM132Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMEM132Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMEM132B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMEM132Bの機能に不可欠なTMEM132Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMEM132Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMEM132B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTMEM132B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMEM132B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMEM132B HDRプラスミド（h）および TMEM132B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMEM132Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMEM132B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。