Tak1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400364-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Tak1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Tak1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Tak1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MAP3K7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Tak1 Anticorpo (C-9): sc-7967
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Tak1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400364-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Tak1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400364-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP3K7 codifica a TAK1 (TGF-β–activated kinase 1), uma MAP3K que integra sinais de citocinas pró-inflamatórias e de recetores de reconhecimento de padrões para coordenar respostas ao stress e respostas imunitárias. A TAK1 fosforila complexos MAPK e IKK a jusante para regular as vias de sinalização de NF-κB, JNK e p38, moldando programas transcricionais que controlam a inflamação, a apoptose e decisões de destino celular. Em células humanas, a atividade de MAP3K7 influencia a sinalização imunitária inata, a homeostase dos tecidos e as respostas ao stress genotóxico ou oxidativo, tornando-a relevante para estudos de desregulação inflamatória e redes de sinalização oncogénica. A perturbação genética de TAK1 é frequentemente usada para dissecar o cross-talk entre a sinalização mediada por recetores TLR/IL-1R/TNF e a regulação transcricional conduzida por MAPK.
Tak1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MAP3K7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MAP3K7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MAP3K7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MAP3K7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.