TAF II p250 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-435426

概要

Taf1はTAF II p250（TAF1）をコードしており、これはRNAポリメラーゼIIのプレイニシエーション複合体（PIC）の組み立てを核形成し、プロモーター認識と転写出力を統合するTFIID複合体の中核サブユニットです。キナーゼ活性およびアセチルトランスフェラーゼ活性をもつ多機能レギュレーターとして、TAF1はクロマチン構造、転写開始、ならびに細胞周期に連動した遺伝子発現プログラムに影響を及ぼします。マウス系では、Taf1依存的な転写制御は胚発生、神経系遺伝子の制御、そして細胞のストレス応答を形作るプロテオスタシス経路の中核を担っています。TAF1およびTFIIDを介した転写の制御異常は、神経発達に関わる表現型や、疾患モデル化に関連する遺伝子発現恒常性のより広範な破綻と結び付けられています。

TAF II p250 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTaf1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Taf1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Taf1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TAF II p250タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TAF II p250シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Taf1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TAF II p250の機能に不可欠なTaf1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Taf1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TAF II p250 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTAF II p250 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Taf1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TAF II p250 HDRプラスミド（m）および TAF II p250 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTaf1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTaf1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。