TADA2B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406224-NIC

O TADA2B codifica um componente adaptador transcricional dos complexos coativadores SAGA/ATAC de acetiltransferase de histonas, fazendo a ligação entre fatores de transcrição específicos de sequência e a maquinaria de modificação da cromatina. Por meio de interações com GCN5/PCAF e subunidades relacionadas, o TADA2B contribui para a acetilação de histonas, a acessibilidade de promotores e a regulação coordenada de programas de expressão gênica envolvidos no controle do ciclo celular, na diferenciação e nas respostas ao estresse celular. A perturbação da integridade do complexo SAGA/ATAC pode desorganizar a regulação epigenética e a homeostase transcricional, processos frequentemente implicados na transformação oncogênica e em outros distúrbios de regulação gênica. Como regulador associado à cromatina, o TADA2B é relevante para o estudo de mecanismos que acoplam a acetilação de histonas ao início da transcrição e à comunicação entre enhancers e promotores em células humanas.

TADA2B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TADA2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TADA2B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TADA2B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TADA2B interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.