Syncoilin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406493

概要

ヒトのSYNCは、シンコイリン（syncoilin）をコードしている。シンコイリンは中間径フィラメント関連タンパク質で、骨格筋および心筋に豊富に発現し、筋細胞膜（サルコレマ）やZディスク領域に局在する。シンコイリンは、中間径フィラメントのネットワークをジストロフィン関連タンパク質複合体に連結することで細胞骨格の構築に関与し、収縮時の筋線維の完全性とメカノトランスダクション（機械刺激の情報変換）を支える。これらの相互作用を通じて、筋分化、サルコレマの安定化、ならびに機械的ストレス下での筋組織構造の維持に寄与する。SYNCの発現変動やシンコイリンの誤局在は筋疾患の病態で報告されており、ミオパチーに伴う細胞骨格リモデリングやストレス応答経路の研究において重要な対象となる。

Syncoilin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSYNC遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SYNC内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SYNCのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Syncoilinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Syncoilinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SYNC欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Syncoilinの機能に不可欠なSYNCエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SYNCゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Syncoilin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSyncoilin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SYNC遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Syncoilin HDRプラスミド（h）および Syncoilin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSYNCホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSYNC標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。