SURF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423220

概要

Surf2は、サーフェイト遺伝子クラスターに属する保存性の高い核内タンパク質SURF-2をコードしており、遺伝子発現の基本的な制御に関与するとされています。SURF-2は、RNAポリメラーゼII依存的な転写制御や、細胞の恒常性に影響を与えるクロマチン関連プロセスに関与することが示唆されています。SURF-2に関連する制御ネットワークが乱れると、増殖、ストレス応答、分化プログラムに影響が及ぶ可能性があるため、Surf2はゲノム維持や転写バッファリングを研究するうえで有用な結節点となります。サーフェイトクラスター遺伝子の発現異常は複数の疾患関連状況で観察されており、遺伝子発現が破綻した状態におけるSurf2の作用機序を解明する研究を支持しています。

SURF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSurf2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Surf2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Surf2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SURF-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SURF-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Surf2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SURF-2の機能に不可欠なSurf2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Surf2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SURF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSURF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Surf2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SURF-2 HDRプラスミド（m）および SURF-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSurf2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSurf2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。